Aspectos éticos que plantea la investigación biomédica básica / Ethical aspects that create the basic biomedical research

En este artículo se señalan y discuten aspectos éticos de la investigación básica de naturaleza biomédica, considerando todo el proces que va desde la formulación de una hipótesis hasta la publicación y utilización de los resultados obtenidos. Dada la complejidad creciente de las investigaciones, en los últimos años se han producido cambios notables en su ejecución, como el carácter multidisciplinario y en consecuencia multiautoral, el elevado costo, el financiamiento por empresas privadas y la necesidad de abordar el patentamiento de los resultados. Lo anterior ha producido la aparición de nuevas situaciones que son imprescindibles de considerar con un enfoque ético. Se analizan también los conflictos de interés que se le presentan al investigador formado contemporáneo, en sus múltiples roles de formador de recursos humanos, asesor en entidades de financiamiento y decisión de prioridades en la investigación, o como revisor de manuscritos a publicar. Se exponen además definiciones de inconducta científica aceptadas por la comunidad de investigadores, pero aún sujetas a debate para lograr una mayor adecuación a los problemas éticos que se presentan dentro de la siempre cambiante investigación biomédica

Prevalencia de Mycoplasma orale como contaminante de los cultivos celulares en la Argentina / Prevalence of Mycoplasma orale as a contaminant of cell cultures in Argentina

Sobre un total de 200 cultivos celulares de distinto origen y provenientes de diferentes laboratorios de la Argentina se ha encontrado, utilizando la técnica de tinción fluorescente de DNA, que el 70% de los cultivos se encuentran contaminados con micoplasmas. Para determinar el serotipo contaminante se seleccionaron al azar 50 cultivos positivos y se estudiaron con sueros patrones por la técnica de inmunofluorescencia. Los resultados muestan que sobre 41 cultivos positivos el 40% están contaminados con Mycoplasma orale II, y en menor proporción con M. hyorhinis (12%), A. laidlawii-A (12%), M. arginini (5%), M. orale III (8%) y A laidlawii-B(2%). El 21% de los serotipos contaminantes de los cultivos analizados no pueden ser identificados. Nueve de los cultivos estudiados presentaron contaminación con dos y hasta tres micoplasmas diferentes. La prevalencia del M. orale, cuya fuente es el operador, en los cultivos infectados con uno o más micoplasmas señala la importancia de adoptar buenas técnicas de trabajo para evitar contaminaciones

Variacion de parametros sanguineos en Calomys musculinus infectados con virus Junin, cepa XJCL3 / Blood parameters variation in Calomys musculinus infected with Junin virus, strain XJCL3

Se investigó la eolución virológica, hematológica y de los nveles de glucemia de Calomys musculinus neonatos infectados con virus Junin, cepa XJCi3 por vía intraperitoneal. Como controles se utilizaron animales sanos y cricétidos inoculados con un homogeneizado de cerebro de ratón blanco no infectado. Los cricétidos que recibieron virus Junin desarrollaron el cuadro característico de la infección aguda, muriendo entre 50-70%. Se aisló virus del cerebro de los animales infectados, durante la fase aguda de la enfemedad, a partir del 6ª día post infectión, siendo el título de alrededor de 10***8 DL50/ml a los 12 días post infección. A partir del día 11 pi. todos los animales infectados presentaron anticuerpos neutralizantes que perduiraron durante el estado crónico de la infección, iniciado después del día 24 pi. Del análisis de los valores hematolóficos obtendos durante la fase aguda, se concluye que aproximadamente el 40% de los animales inoculados presentan linfopenia y neutrofilia, mientras que en la fase crónica nose encontraron modificaciones. Los estudios de glucemia realizados durante la infección aguda demostraron hipoglucemia (X=3,52mmol/VI) en el lote de animales infectados respecto del grupo control (X = 6,15 mmol/l) con una p < 0,01)

Inhibición del virus de pseudorrabia (Suid herpesvirus 1) por acción de un antiviral aislado de hojas de Melia azedarach / Inhibition of the pseudorabies virus (Suid herpesvirus 1) by an antiviral agent isolated from the leaves of Melia azedarach

Los extractos crudos y purificados de hojas verdes de Melia azedarach L (nombre vulgar: árbol del Paraíso) inhiben la acción citopática y la producción de viriones del virus de pseudorrabia (Suid herpesvirus 1) en células Vero. Para que esto ocurra el antiviral debe agregarse después de la adsorción viral y conservarse en el medio de cultivo hasta la cosecha del virus. La acción del antiviral vegetal es específica ya que se manifiesta en concentraciones que no son tóxicas para la célula huésped. El inhibidor no tiene propiedades virucidas ni impide la adsorción ni la penetración viral. Su blanco de acción es intracelular y se expresa aún agregado a las células infectadas cuatro horas después que el virus. De acuerdo con estos resultados se postula que su blanco de acción probable es la transcripción temprana de los genes virales

Presencia de micoplasmas en cultivos celulares de Argentina / Presence of Mycoplasma in cell cultures of Argentina

Se investigó la presencia de micoplasmas como contaminantes en cultivos celulares utilizados para la propagación de virus. Se analizaron muestras provenientes de laboratorios ubicados en la ciudad de Buenos Aires y las provincias de Córdoba y Buenos Aires. Como método de detección se utilizó la tinción celular con el reactivo fluorescente de Hoechst 33258 (bisbenzimida), que se une específicamente al ADN. Treinta y tres de las 51 líneas celulares estudiadas (65%), estaban contaminadas. En todos los laboratórios donantes se detectó por lo menos una línea celular con algún grado de contaminación, a pesar de que cuentan con el equipamento indispensable para trabajar en condiciones de esterilidad. Ante esta situación concluímos que los perjuicios que acarrea la presencia de micoplasmas en los cultivos, no han sido apropiadamente evaluados

Susceptibilidad del ratón de 11 días a la infección con virus Junin propagado en distintos huéspedes / Susceptibility of 11 days old mice to infection with Junin virus propagated in several different hosts

Se analizaron algunas propiedades de doce clones de virus Junín obtenidos en células Vero, comparándolos entre sí, y respecto del "stock" parental preparado en cerebro de ratón lactante. No se encontraron diferencias significativas entre los mismos y en relación al virus parental cuando se determinaron la termolabilidad, termosensibilidad y patogenicidad para ratón lactante de 2 días de edad. En cambio el índice de virulencia (UFP/DL) para el ratón de 11 días resultó entre 50 y 100 veces menor para los clones analizados. Se pudo demostrar que esta variación en la virulencia era dependiente del huésped donde multiplicó en virus ya que un solo pasaje del "stock" parental por células Vero o BHK redujo 100 a 1000 veces el índice de virulencia para el ratón de 11 días, mientras que un pasaje posterior por cerebro de ratón, revirtió el índice a valores semejantes al obtenido para el "stock" de cerebro. Significativamente cuando el virus de cerebro sufrió un pasaje por células de embrión de ratón originó una población de virulencia intermedia. La dependencia de la virulencia con el huésped se obtuvo en forma independiente de la cepa de virus utilizada y solo se manifestó entre los 10 y 12 días de edad, antes y después de ese período las curvas de mortalidad de los ratones siguieron patrones similares. Estos resultados sugieren que la presencia de antígenos histocompatibles desempeñan un rol principal en la producción de la encefalitis, lo que se manifiesta claramente a la edad de 11 días

Aislamiento de virus Junín a partir de sangre y linfomonocitos periféricos de Calomys musculinus infectados / Isolation of Junin virus from blood and peripheral lymphomonocytes of infected Calomys musculinus

La inoculación experimental de Calomys musculinus neonatos con la cepa XJCl3 de virus Junín (VJ) provoca muerte en algunos, mientras que se establece una infección persistente en la mayoría de los sobrevivientes. El VJ puede ser rescatado de macrófagos peritoneales a tiempos tempranos post-infección, y de cerebro y glándulas salivales durante la etapa crónica de la enfermedad. Fue de interés investigar la posible aparición de virus en sangre. Para ello se realizó una búsqueda secuencial de viremia luego de la inoculación de C. musculinus neonatos con VJ por vía intraperitoneal. Se registró una alta frecuencia de viremia durante la fase aguda de la enfermedad, las que se hicieron más aisladas a tiempos post-infección más tardíos y se tornaron esporádicas durante la etapa crónica. En base a estos resultados, al linfotropismo característico de los arenavirus y a la conocida replicación del VJ en células mononucleares humanas, se realizaron cultivos de linfomonocitos de sangre periférica provenientes de C. musculinus infectados para investigar la eventual presencia de virus infeccioso en los sobrenadantes respectivos. Fue posible rescatar VJ en bajos títulos de aquellos cultivos establecidos con células provenientes de animales que cursaban la etapa aguda de la enfermedad; en el caso de los animales crónicos, el aislamiento viral fue negativo. Estos resultados muestran que la viremia es un hecho común durante la etapa aguda de la infección experimental de C. musculinus y que las células mononucleares sanguíneas del mismo son permisivas para la multiplicación del VJ